TEV Protease
TEV Protease (烟草蚀纹病毒蛋白酶；Tobacco etch virus protease) 是来源于烟草蚀纹病毒(TEV) Nla的重组蛋白酶，此蛋白酶被用来切除纯化后融合蛋白的亲和标签。
储存温度：
TEV Protease(10 U/μl)长期储存于-80℃，可保存2年；或小量分装后保存于-20℃，可保存6个月，避免反复冻融。10×TEV Buffer置于-20℃保存即可。
产品介绍：
TEV Protease (烟草蚀纹病毒蛋白酶；Tobacco etch virus protease) 是来源于烟草蚀纹病毒(TEV) Nla的重组蛋白酶，此蛋白酶被用来切除纯化后融合蛋白的亲和标签。TEV Protease具有很强的位点特异性，能够识别EXXYXQ(G/S)的七氨基酸序列(Glu-Asn-Leu- Tyr-Phe- Gln-Gly)，最普通的是ENLYFQG，其切割位点在谷氨酰胺和甘氨酸或丝氨酸之间。该酶在PH 5.5-8.5和4-30℃的广泛范围内皆有活性，使得反应条件的选择可根据目的蛋白的情况而修改。TEV Protease自大肠杆菌表达经亲和纯化的重组蛋白酶。TEV Protease带有多聚组氨酸标签，酶切反应完毕后可通过亲和层析去除。
酶活性单位定义：
在1×TEV Buffer (50 mM Tris-HCl, pH8.0, 0.5 mM EDTA, 1 mM DTT) 中，30℃条件下反应1 h，能够切割3 µg的反应底物达85%以上所需的酶量定义为一个活性单位。
应用：融合蛋白标签剪切去除。
操作方法：
若蛋白为热不稳定性，请在4℃孵育较长时间或增加酶的用量。
1.在 EP 管中配置如下反应体系：
融合蛋白 | 50 μg |
TEV Protease(10 U/μl) | 1-5 μl |
10× TEV Buffer | 15 μl |
ddH2O | Up to 150 μl |
2.混匀上述体系后于30℃孵育，在 1、2、4、6小时分别吸出30 μl上述反应液，置于单独的EP管中。
3.向上述EP管中加入30μl 2×SDS Loading Buffer, 置于-20℃。
4.样品全部反应完成后，样品煮沸5 min，取30-40 μL进行SDS-PAGE分析。确定最佳反应时间。
注意事项：
为达到最好的酶切效果，请保证重组蛋白为部分或完全纯化的蛋白。