区别于拓扑克隆、 TA 载体克隆和酶切克隆等常规克隆方法,无缝克隆技术可在重组酶的作用下,只需一步反应,便可将片段克隆到任何载体中的任意位置得到重组质粒。通过设计同源重组臂(15-25bp),可将单一片段定向克隆至载体任意位置,最终得到无缺口闭环质粒。