普通PCR
SYBR Green I 20× for PCR
发布者:博迈德生物发布时间:2021-11-016404
储存条件: -20°C保存。
产品介绍:
SYBR Green I与dsDNA 结合荧光信号可增强800~1000倍。在PCR反应体系中,加入过量SYBR Green I荧光染料,它特异性地掺入DNA双链后,荧光信号增强,而不掺入链中的SYBR Green I染料分子荧光不变,从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加完全同步。荧光可以在退火阶段或者延伸阶段测定。
1.使用浓度对荧光PCR结果的影响
SYBR Green I的使用浓度是保证荧光定量PCR实验成功非常关键的因素。如果SYBR Green I的浓度过低会使荧光信号的变化降低,这就意味着低拷贝的样品可能无法检出。而在高浓度时,将会抑制PCR反应,降低PCR反应效率。所以一般在使用SYBR Green I时应根据实际情况优化使用浓度,反应的终浓度为1×到0.2×之间。
2.Mg2+浓度的影响
提高Mg2+浓度可以降低SYBR Green I对PCR反应的抑制作用。我们建议在用SYBR Green I进行荧光PCR反应时,Mg2+浓度比无SYBR Green I 的普通 PCR 反应高出0.5~3mM。
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