蛋白抽取与裂解
通用蛋白裂解/抽提试剂
发布者:博迈德生物发布时间:2018-02-013887
保存条件:室温避光保存。
产品介绍:
本产品的主要成分为含有20mM Tris(pH 7.5)、EDTA、NaCl等成份的缓冲液体系中加入了特殊的非离子型去垢剂,以及sodium pyrophosphate等数种蛋白磷酸酶抑制剂,能裂解细胞并在非变性条件下释放胞浆蛋白和可溶性膜蛋白、核蛋白。同时维持了原有的蛋白间相互作用并保留了蛋白的特性和功能,如抗原-抗体结合或酶学活性,因此本试剂抽提得到的蛋白不仅适用于Western blot,免疫沉淀,还适宜于进行蛋白活性功能检测和免疫共沉淀。由于加入了多种磷酸酶抑制剂,尤其适宜于磷酸化蛋白的免疫共沉淀或Western blot 研究。此外有些对蛋白天然构象亲和力高的抗体或者只能识别非变性抗原结合位点的抗体,这种情况应该使用本品在非变性条件下裂解细胞。
注意事项:
1.裂解得到的蛋白样品,由于含有较高浓度的去垢剂,不能用Bradford法测定蛋白浓度,可以选用本公司生产的BCA蛋白定量试剂盒测定蛋白浓度。
2.用户使用前需加入蛋白酶抑制剂如PMSF或者根据需要再加入leupeptin,aprotinin等其它抑制剂。
3.裂解蛋白的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
(具体操作详见说明书)
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