Western

蛋白印迹膜再生液Stripping Buffer

发布者:博迈德生物发布时间:2018-02-0138

货号 产品名称 规格 价格(元) 说明书下载
PA109-01 蛋白印迹膜再生液Stripping Buffer 12次 220
PA109-02 40次 620

保存条件:本产品收到后按照上面指示温度存放各成份,12个月内有效。


产品介绍:


蛋白印迹膜再生液,用于 Western blot中转移了蛋白的膜的重复利用。在 Western blot 中完成抗体孵育和后续的化学发光检测后,有时还需要检测、Actin 、Tubulin 等表达量相对稳定的蛋白作为参照,或检测其它蛋白进行比较。通过使用蛋白印迹膜再生液中特殊成份解离抗体和印迹膜上抗原的结合从而去除抗体,即可非常方便地重新利用同一张膜检测其它蛋白。与重新跑一个SDS-PAGE胶,不仅省时省力,而且可以消除重新上样而带来的误差,使可比性更强


产品特点:


1.理想的再生液应该是洗脱抗体的同时,不洗脱膜上结合的蛋白或者改变抗原的结合性质,但是目前没有一种再生液可以做到只洗脱抗体,而完全不洗脱膜上结合的抗原。也没有一种再生液可以适用于所有不同亲和度的抗原抗体复合物,太强,则抗原也容易 被洗脱;太弱,则抗体残留太高。本试剂盒配备了两种适用不同亲和力抗原抗体复合物的配方(Strong buffer 和Mild buffer),用户可以根据自己抗原抗体结合强度选用。


2.传统分子克隆上介绍的方法对抗原洗脱强度过大,常常会导致蛋白信号的减弱。本公司的本再生液为独有的配方,效力强,但是对蛋白作用温和,经过多个抗体的检测试验,通常可以重复利用膜5次或者更多。


3.不含有常用的β-巯基乙醇,没有异味,操作简单快速,室温进行,最快15-20min就可以完成全过程。


注意事项:


1.本试剂盒里面包括两种配方的再生液(strong buffer 和 mild buffer),大家可以根据自己使用抗体和抗原的亲和度选用,但是两种再生液不可以混合在一起使用。


2.再生液使用后应该立刻盖紧盖子,避免长时间和空间接触导致pH和质量改变,影响使用效果。


3.Strong buffer 有轻度腐蚀性,为了您的安全,请带乳胶手套操作,如果不小心溅入眼睛,请用大量清水冲洗。


4.为了达到最佳效果,推荐使用PVDF膜,尤其strong buffer对PVDF膜效果更好。


5.适用于 ECL和类似的化学发光试剂进行的 Western 检测。不适用于非化学发光试剂进行的 Western检测,例如DAB,NBT/BCIP。


6.需要再生的膜如果干了,则洗脱效率非常低,因此如果决定要做膜再生,应该做完底物化学发光后,立刻将湿润状态的膜放入PBS中4℃保存直到开始再生过程。


7.在实践应用中,我们发现有时候部分亲和力很弱的抗原抗体,用strong buffer效果反而比mild buffer差,有时候亲和力很强的抗体,用mild buffer效果却更好。因此,实际过程中,亲和力强的抗体,即使strong buffer效果不好,也一定要试试mild buffer 是否效果更好。


(具体操作详见说明书)