克隆相关

NUCLEIC ACID PURIFICATION

T4 DNA Ligase

发布者:博迈德生物发布时间:2018-02-021434

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CL301-01 T4 DNA Ligase 500U 320
CL301-02 500U×10 3000


   度: 5U/μl

 

产品概述:

 在有Mg2+ATP存在的条件下,T4 DNA Ligase能催化双链 DNARNA上相邻的5´-磷酸末端和3´-羟基末端形成磷酸二酯键。该酶不仅能够催化双链DNA的平末端或粘性末端之间的连接,还可以修复双链 DNARNA  DNA/RNA 杂交双链中的单链切刻,但不能催化单链 DNA 之间的连接。

 

保存条件-20保存,有效期一年。

 

酶储存缓冲液:

 10 mM Tris-HCl (pH 7.5) 50mM KCl1mM DTT 0.1mM EDTA50% (v/v) glycerol

       5 × T4 DNA Ligase Buffer

 250 mMTris-HCl (pH 7.5) 50mM MgCl250mM DTT 5mM ATP,连接促进剂。

 

     源:纯化于携带T4 DNA ligase 基因 E. coli 菌株

 

抑制剂和热失活:

    大于200mMNaClKCl可以强烈抑制连接酶活性。65加热 10分钟或70加热5分钟即可失活。

 

单位定义:

 3720分钟内交换1 nmole 32PPi所需要的酶量定义为一个Weiss单位。本产品酶1U(Weiss Unit)相当于200个粘性末端单位。在T4 DNA 连接酶反应缓冲液中,16条件下,30分钟能够使50%的经Hind III消化的λDNA 片段连接所需要的酶量为一个粘性末端单位。

 

质量控制:

 蓝白斑分析实验表明白斑数小于2%;过量T4 DNA Ligase 混合超螺旋质粒检测实验表明无核酸酶检出;SDS-PAGE检测重组蛋白纯度大于99%

 

(具体操作详见说明书)