普通PCR
HotStart Taq DNA Polymerase (5U/μl)
发布者:博迈德生物发布时间:2018-02-056010
储存条件:-20℃保存
制品说明:
HotStart Taq DNA Polymerase 是一种新型的通过基因改造的热启动酶,该酶在低温时没有活性,94℃加热后开始反应,同时它还利用一个单链DNA黏合蛋白,即single-strand DNA binding protein将primer遮蔽起来,实现引物隔离。以避免在常温下就开始进行非专一性的结合。直到DNA因高温被分开,primer才被释放与目标DNA进行黏合。可以提高目的DNA扩增的特异性和扩增效率。通过有效的抑制引物形成二聚体且不破坏聚合酶功能,此方法相较于传统PCR的方法大大提高了DNA产物的特异性。PCR产物3′端带A,可直接用于TA克隆。
活性单位:1 单位(U)HotStart Taq DNA Polymerase活性定义为在74℃、30分钟内,以活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板引物,将10 nmol脱氧核苷酸掺入到酸不溶物质所需的酶量。
质量控制:SDS-PAGE 检测纯度大于99%,经检测无外源核酸酶活性;PCR方法检测无宿主残余DNA,能有效地扩增人基因组中的单拷贝基因;室温存放一周,无明显活性改变。
酶贮存缓冲液:
20mM Tris-HCl (pH8.0), 0.1 mM EDTA, 1mM DTT, 100 mM KCl, Stabilizers, 50% glycerol。
5×HotStart Taq Buffer (含Mg2+):
100 mM Tris-HCl (pH 8.4), 100 mM KCl, 50 mM(NH4)2 SO4,7.5 mM MgCl2以及其他成分。
适用范围:可用于复杂模板的扩增、多重PCR、短链和长链DNA片断的扩增。产物可以直接用于TA载体克隆。
(具体操作详见说明书)
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