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NUCLEIC ACID PURIFICATION

胰酶细胞消化液(含酚红)

发布者:博迈德生物发布时间:2018-01-301935

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TG102-01 胰酶细胞消化液(含酚红) 10ml 50
TG102-02 100ml 90


储运温度:-20℃保存,一年有效。

 

产品介绍:

 胰酶细胞消化液(含酚红) (Trypsin-EDTA Solution with phenol red)0.25%胰酶、0.02%EDTA和少量酚红,由D-Hanks配制而成。该消化液经过滤除菌,可以直接用于贴壁培养细胞的消化以及一些组织块的消化。

 本胰酶细胞消化液采用Amresco 公司的Trysin1:250)配制而成,通常室温处理1min左右就可以消化下大多数贴壁细胞。

 

使用说明:

1.贴壁细胞的消化:

1)从-20℃冰箱中取出胰酶消化液,置于室温化冻备用。频繁使用时,可将胰酶放在4℃冰箱中,长时间不用请置于-20℃冻存。使用胰酶消化细胞前,请将胰酶置于室温15min以平衡胰酶温度(胰酶活性与温度相关)。

2)去掉待消化细胞的原有培养液,用适量的无菌PBSD-Hanks液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。

3)往培养器皿中加入少量胰酶细胞消化液,稍盖过细胞即可,轻轻晃动培养皿或培养瓶,使胰酶均匀分布。室温放置30 sec2 min。消化时间的长短因细胞种类而不同。

4)肉眼观察培养器皿底部,瓶底由半透明(细胞单层连接成片)转为点状透明(出现细小空隙);或者用吸头吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来;显微镜下观察,细胞明显收缩。有上述3种情况发生可判定细胞消化完成,即可弃去胰酶消化液。加入1ml含血清的完全细胞培养液,终止胰酶的消化作用。用吸管或吸头吹打细胞使细胞分散开。

5)如果发现消化不足,则需要离心细胞以除掉血清,重新加入胰酶细胞消化液重新消化。

6)如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落,可直接加入1ml含血清的完全细胞培养液,终止胰酶的消化作用,全部吹打下来。1000-2000g离心1 min,沉淀细胞,尽量去除液体后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。

 

2.组织的消化:

 胰酶消化液用于组织块消化时,通常将组织块剪成1-2mm大小的小块,在37℃水浴中消化,消化程度以充分打散组织为宜。