蛋白定量

BCA 蛋白定量试剂盒

发布者:博迈德生物发布时间:2018-02-014948

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PA101-01 BCA 蛋白定量试剂盒 500次 400


保存条件:本产品收到后按照上面指示温度存放各成份,至少一年内有效。蛋白标准-20长期保存,常温运输。

 

产品介绍:

  BCA(bicinchoninic acid)法蛋白浓度定量试剂盒是常用的蛋白浓度检测方法之一BCA法基础上改进而成。原理是在碱性的条件下,蛋白质中的肽键能将Cu2+还原成Cu1+(双缩脲反应),且Cu2+的还原量与总蛋白量成正比,生成的Cu1+和独特的BCA Solution A(含有BCA)相互作用形成紫色复合物。两分子的BCA螯合一个铜离子形成复合物,该水溶性的复合物在562nm处显示强烈的吸光性,吸光度和蛋白浓度在广泛范围内有良好的线性关系,因此根据吸光值可以推算出蛋白浓度。

 

产品特点:

1.操作简单,45min内完成测定,比经典Lowry法快4倍而且更加方便。

2.灵敏度高,检测浓度下限达到25μg/ml,最小检测蛋白量达到0.5μg,待测样品体积为1-20μl

3.BCA法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的去污剂等化学物质的影响,可以兼容样品中高达5%SDS5%Triton X-1005%Tween 206080

4.20-2000μg/ml浓度范围内有良好的线性关系。

 5.在测定范围内有较好的线性关系,变异系数小

 

注意事项:

  1.蛋白标准请在全部溶解后先混匀,再稀释成一系列不同浓度的蛋白标准。标准品曲线配制时,如果吸量不准确或者加样枪不精确会造成标准曲线相关系数减小,可根据需要使用倍比梯度稀释的方法来配制,或者使用精确度高的加样枪。

   

  2.Solution ASolution B混合成工作液时可能会出现浑浊,但充分振荡混匀后就会消失,成为淡绿色的透明溶液。

  3.酶标仪的测定波长为540-590nm之间,562nm最佳;需96孔板。如果没有酶标仪,也可以使用普通的分光光度计测定,但是测定蛋白浓度时,需根据测定吸光度的杯子的体积,按比例调整A液,B液和样品的体积。使用分光光度计测定蛋白浓度时,每个试剂  盒可以测定的样品数量可能会显著减少。

 4.BCA蛋白定量试剂盒受螯合剂和略高浓度的还原剂的影响,需确保无EDTA EDTA低于10mM,二硫苏糖醇低于1mMβ-巯基乙醇低于1mM。不适用BCA法时建议使用Bradford法蛋白定量试剂盒。还可以考虑用超纯水稀释,透析/除盐,ACETONE/TCA沉淀  蛋白后重溶于超纯水等方法来消除干扰物质的影响。

 5.为了加快BCA法测定蛋白浓度的速度可以适当用微波炉加热,但是切勿过热。

 6.如发现样品稀释液或裂解液本身就有较高背景,请试用Bradford法蛋白定量试剂盒。

 

(具体操作详见说明书)